Publicação
Citogenética convencional e FISH - Apoio no diagnóstico pós-natal
| Resumo: | A citogenética dedica-se ao estudo da descrição da estrutura e do número dos cromossomas, possibilitando a identificação de alterações cromossómicas associadas a vários fenótipos com alterações. A análise citogenética pode ser utilizada em contexto de diagnóstico pós-natal, sendo o sangue periférico e os fibroblastos, os tipos de tecidos utilizados com mais frequência. No diagnóstico pós-natal existem várias indicações clínicas para estudo citogenético. As alterações cromossómicas são a principal causa de défice cognitivo, de desenvolvimento anomalias congénitas no Homem. Os casais com história de abortos espontâneos de repetição possuem uma probabilidade de serem portadores de alterações cromossómicas. Outra indicação frequente para estudo citogenético é a infertilidade, sendo o síndrome de Klinefelter e o síndrome de Turner as causas mais comuns da infertilidade masculina e feminina respetivamente. Em cerca de 50% dos abortos espontâneos é identificada uma alteração cromossómica, nomeadamente aneuploidia ou poliploidia, devido a erro mitóticos, meióticos ou pós-zigótico, rearranjos desequilibrados de novo e produtos da segregação desequilibrada das translocações equilibradas dos pais. A realização deste trabalho teve como principais objetivos a aprendizagem da prática laboratorial das técnicas de citogenética convencional e citogenética molecular e na aquisição de experiência na área de diagnóstico pós-natal. Durante o estágio de mestrado realizado no Laboratório de Genética do Centro Hospitalar de Trás-os-Montes e Alto Douro foram realizadas culturas de sangue periférico, uma sem sincronizadores e 41 culturas sincronizadas, e 23 culturas de produtos de abortamento. Todo o procedimento até à obtenção de metáfases foi executado, com particular atenção ao espalhamento com o objetivo de se obter metáfases com uma boa dispersão dos cromossomas. Em todas as amostras aplicou-se a técnica de bandeamento GTL, com o objetivo de classificar e organizar os cromossomas segundas as recomendações do Sistema Internacional de Nomenclatura Citogenética Humana (ISCN, 2016), e complementadas por bandeamento CBL e NOR para esclarecimento de dúvidas na análise. Foi também realizada em 3 amostras a técnica de FISH com sondas de sequência única para o cromossoma 7 e para o cromossoma 22, para confirmar a análise por citogenética clássica. Nas culturas das amostras de sangue periférico obtiveram-se metáfases que permitiram a sua análise. Nos produtos de abortamento obteve-se crescimento celular em 18 casos. Em relação à análise citogenética, 4 nas amostras de sangues apresentavam alterações cromossómicas, nomeadamente um com o síndrome de Klinefelter, um caso com uma translocação envolvendo os cromossomas 8 e 17, um com um derivativo dos cromossomas 14 e 21 e um caso com uma inversão do cromossoma 11. Nos produtos de abortamento, foram observados 7 casos com aneuploidias (45,X, 47,XX,+22, 47,XX,+16, 47,XY,+15, 47,XY,+22 e dois casos com tetraploidias). As técnicas citogenéticas e o FISH utilizados neste trabalho foram um meio de diagnóstico importante para os casos em estudo pois permitiram, em alguns casos, a identificação de alterações cromossómicas. Com este estágio, foi adquirida experiência numa área laboratorial importante no apoio ao diagnóstico. |
|---|---|
| Autores principais: | Pereira, Ana Catarina Alves |
| Assunto: | Citogenética alterações cromossómicas |
| Ano: | 2021 |
| País: | Portugal |
| Tipo de documento: | dissertação de mestrado |
| Tipo de acesso: | acesso aberto |
| Instituição associada: | Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro |
| Idioma: | português |
| Origem: | Repositório da UTAD |
| Resumo: | A citogenética dedica-se ao estudo da descrição da estrutura e do número dos cromossomas, possibilitando a identificação de alterações cromossómicas associadas a vários fenótipos com alterações. A análise citogenética pode ser utilizada em contexto de diagnóstico pós-natal, sendo o sangue periférico e os fibroblastos, os tipos de tecidos utilizados com mais frequência. No diagnóstico pós-natal existem várias indicações clínicas para estudo citogenético. As alterações cromossómicas são a principal causa de défice cognitivo, de desenvolvimento anomalias congénitas no Homem. Os casais com história de abortos espontâneos de repetição possuem uma probabilidade de serem portadores de alterações cromossómicas. Outra indicação frequente para estudo citogenético é a infertilidade, sendo o síndrome de Klinefelter e o síndrome de Turner as causas mais comuns da infertilidade masculina e feminina respetivamente. Em cerca de 50% dos abortos espontâneos é identificada uma alteração cromossómica, nomeadamente aneuploidia ou poliploidia, devido a erro mitóticos, meióticos ou pós-zigótico, rearranjos desequilibrados de novo e produtos da segregação desequilibrada das translocações equilibradas dos pais. A realização deste trabalho teve como principais objetivos a aprendizagem da prática laboratorial das técnicas de citogenética convencional e citogenética molecular e na aquisição de experiência na área de diagnóstico pós-natal. Durante o estágio de mestrado realizado no Laboratório de Genética do Centro Hospitalar de Trás-os-Montes e Alto Douro foram realizadas culturas de sangue periférico, uma sem sincronizadores e 41 culturas sincronizadas, e 23 culturas de produtos de abortamento. Todo o procedimento até à obtenção de metáfases foi executado, com particular atenção ao espalhamento com o objetivo de se obter metáfases com uma boa dispersão dos cromossomas. Em todas as amostras aplicou-se a técnica de bandeamento GTL, com o objetivo de classificar e organizar os cromossomas segundas as recomendações do Sistema Internacional de Nomenclatura Citogenética Humana (ISCN, 2016), e complementadas por bandeamento CBL e NOR para esclarecimento de dúvidas na análise. Foi também realizada em 3 amostras a técnica de FISH com sondas de sequência única para o cromossoma 7 e para o cromossoma 22, para confirmar a análise por citogenética clássica. Nas culturas das amostras de sangue periférico obtiveram-se metáfases que permitiram a sua análise. Nos produtos de abortamento obteve-se crescimento celular em 18 casos. Em relação à análise citogenética, 4 nas amostras de sangues apresentavam alterações cromossómicas, nomeadamente um com o síndrome de Klinefelter, um caso com uma translocação envolvendo os cromossomas 8 e 17, um com um derivativo dos cromossomas 14 e 21 e um caso com uma inversão do cromossoma 11. Nos produtos de abortamento, foram observados 7 casos com aneuploidias (45,X, 47,XX,+22, 47,XX,+16, 47,XY,+15, 47,XY,+22 e dois casos com tetraploidias). As técnicas citogenéticas e o FISH utilizados neste trabalho foram um meio de diagnóstico importante para os casos em estudo pois permitiram, em alguns casos, a identificação de alterações cromossómicas. Com este estágio, foi adquirida experiência numa área laboratorial importante no apoio ao diagnóstico. |
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