Anacor Pharmaceutical’s core technology platform is based on the use of boron chemistry to develop novel therapies. Boron-based compounds have a unique geometry that allows them to have two distinct shapes, giving boron-based drugs the ability to interact with biological targets in novel ways and to address targets not amenable to intervention by traditional, carbon-based compounds. Boron’s reactivity allows boronbased compounds to interact with a biological target that is specific to a particular disease or condition and create a change in that target. The anti-inflammatory properties of some Anacor compounds merged with research in the etiology of psoriasis could improve this pathological condition. Initially the origin of psoriasis was attributed to keratinocytes, but nowadays is a known fact that it’s the close relationship between those cells and several others immune cells that creates the symptoms and typical lesions of this pathology – well-demarcated erythematous, scaly plaques with epidermal hyperplasia (acanthosis) accompanied by parakeratosis. Analysis of the cell infiltrates as well as the type of cytokines and chemokines present in the psoriatic lesions, first lead researchers to believe that this was either a T helper 1 (TH1) disease (due to the high levels of Interleukin-12 (IL-12) and Interferon-γ (IFN-γ) and CD4+ cells) or an autoimmune disease (where the immune system would auto-react against own keratinocytes). With the discovery of a novel cytokine – Interleukin-23 (IL- 23) - that shares the p40 subunit with IL-12 and also the IL-12Rβ1 receptor, but not the IL-23R, a new possible path was initiated. Unlike IL-12, the new discovered cytokine – IL-23 does not act on naïve T cells, but it does act on memory T cells. The IL-12 initially found in psoriatic lesions is actually IL-23 and a relationship was build between this and another cytokine – Interleukin -17 (IL-17). Further research lead to the findings of a CD4+ subset that produces IL-17 (and other important cytokines) which was then designated T helper 17 (TH17). IL-23 is responsible for maintaining the growth of this subset of immune cells and both IL-23 and TH17 were implicated in psoriasis. Due to the structural similarity with IL-12, it was thought that the same inhibitory mechanisms that inhibit IL-12 could also inhibit IL-23 production. Phosphodiesterase 4 (PDE4) is the major cyclic AMP (cAMP)-metabolizing enzyme found in inflammatory and immune cells. Therefore and since there’s a wide range of cytokines whose production is inhibited by PDE4 inhibitors, Structure Activity Relationship (SAR) was built having IL-23 inhibition data along with PDE4 inhibition data for Anacor compounds and commercially available compounds known to inhibit PDE4 (i.e. Rolipram, Ibudilast and others). The present work shows that the PDE4 inhibition does not correlate with IL-23 inhibition, not just by the fact that there are several compounds that inhibit the cytokine but not the enzyme and the other way around, but also because the commercially available compounds known to inhibit the PDE4 do not inhibit IL-23 production. Investigating further on and continue to look for IL-23 inhibition by structurally different chemical compounds synthesized as well as trying to understand the pathways by which IL-23 is produced would hopefully in the future increase the amount of information available about this cytokine regulation.

Introdução: Inúmeras células da resposta imune são envolvidas durante uma resposta antitumoral efetiva, dentre elas, linfócitos T citotóxicos e T auxiliares (Th). Vários estudos demonstram que a regressão tumoral é dependente da produção de IL-12, tanto em situações espontâneas ou quando o paciente é submetido a algum tipo de imunoterapia. Recentemente, foi descrito um novo subtipo de Th, o Th12, que está presente em humanos e animais com tumores. Contudo, sua função e a interação desse subtipo na resposta antitumoral ainda não estão claras. Portanto, neste estudo, assumimos como objetivo esclarecer se a imunoterapia de pacientes com células dendríticas, poderia alterar a quantidade desse novo subtipo, bem como investigar quais outras citocinas, além da IL-12, estariam sendo produzidas por esses linfócitos, como a interleucina-2 (IL-2), interferon-ɣ (IFN-ɣ), fator de necrose tumoral-α (TNF-α) e interleucina-10 (IL-10). Metodologia: Para a análise deste trabalho, quinze pacientes oncológicos foram submetidos à imunoterapia com CDs e os linfócitos do sangue periférico foram avaliados antes e após as duas primeiras imunoterapias. Resultados: Como resultados, verificou-se que em mulheres com câncer, a célula CD4+/IL-12+ apresentou a %GATE aumentada (*** p<0.0001) e a MFI (média de intensidade de fluorescência) diminuída (***p=0,0002) e as citocinas IFN-γ (**p=0,0093) e IL-2 (***p= 0,0010) apresentaram a MFI diminuída. Durante as fases da imunoterapia, a IL-12 apresentou uma diminuição na sua %GATE (*p= 0,0312). Conclusão: Mulheres com câncer invasivo apresentam níveis aumentados de linfócitos T auxiliares IL-12 e as duas primeiras imunoterapias com CDs induziram uma diminuição da diferenciação desse tipo celular.

INTRODUÇÃO: De papel indispensável, as células dendríticas, importantes apresentadoras de antígeno com heterogeneidade fenotípica e funcional, ligam as respostas imunes inatas e adaptativas. São responsáveis pela regulação e modulação de respostas efetoras contra microrganismos e células tumorais, também realizam a manutenção da tolerância imunológica em condições homeostáticas. Sua plasticidade funciona de acordo com estímulos e microambiente em que estão inseridas. A imunoterapia utilizando essas células, está em constante estudo para a obtenção de ativação suficiente de uma resposta imune celular. Vários protocolos e patentes foram e ainda são testados para diferenciação e maturação de um perfil apropriado de células dendríticas para uma imunoterapia eficaz. OBJETIVO: Testar o perfil de ativação e migração apresentado pela cultura de células dendríticas submetida a maturação por diferentes protocolos de estímulos (TNF-α e TNF-α, IL-12 e CCL5) em ensaio in vitro. METODOLOGIA: Sangue periférico de voluntários saudáveis (n=10) foi utilizado para o isolamento de monócitos e linfócitos. As células aderentes foram diferenciadas em células dendríticas que foram submetidas a maturação por 2 diferentes protocolos (protocolo 1 com estímulo de TNF-α; protocolo 2 referente a estimulação com TNF-α, IL-12 e CCL5) e posteriormente co-cultura com células não aderentes. Para a caracterização do perfil fenotípico das células totais (aderentes e não aderentes), foi analisada a intensidade média de fluorescência de marcadores de superfície (CD209, CD11c, HLA-DR, CD123, CD209, CD80, CD86, CD83, CD3, CD8, CD4, CD25, FOX-P3, NKG2D e CD54) e citocinas (granzimas, perforinas, IL-10, IFN γ, TNF-α, IL-12, TGF-β, IL-4 e IL-17), por citometria de fluxo. A migração das células dendríticas maturadas foi vista sobre coloração e contagem de células em membrana de poliestireno submetidas a cultura com um gradiente quimiotático (MCP-1 e CCL5). RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os resultados mostram aumentos significativos na expressão de moléculas de adesão/co-estimulatórias CD209, CD11c, HLA-DR, CD123, CD80, CD86, CD83 e citocinas (IFN-γ, TNF-α, IL-12, IL-10 e TGF-β) das células dendríticas do protocolo 2 comparado com o protocolo 1. De tal forma, vemos a ativação de subtipos importantes de células T (Th1 e Th17, com redução de Treg) e Natural Killer (NK) produtoras de IFN-γ, com expressão diminuída de IL-10 no mesmo protocolo. CONCLUSÃO: Nossos estudos indicam que o protocolo de estimulação com TNF-α, IL-12 e CCL5 foi capaz de gerar um perfil de células dendríticas maduras e eficazes para ativação de subtipos balanceados de linfócitos T e células NK, importantes na resposta imune antitumoral.

OBJETIVO: Examinar o comportamento da interleucina-12 e verificar se pode ser utilizada para diferenciar condições sépticas em crianças. MÉTODOS: Foram inscritas, de forma prospectiva, entre janeiro de 2004 e dezembro de 2005, crianças com idades de 28 dias a 14 anos, subdivididas nos grupos sepse (SG; n=47) e choque séptico (SSG; n=43). A interleucina-12 foi avaliada quando da admissão (T0) e 12 horas mais tarde (T12). A gravidade da doença foi avaliada utilizando o escore PRISM. RESULTADOS: A interleucina-12 não diferenciou crianças com sepse das com choque séptico quando da admissão [SSG: 0,24 (0-22,64)=SG: 1,23 (0-511,6); p=0,135)] e na avaliação T12 [SG: 6,11 (0-230,5)=SSG: 1,32 (0-61,0); p=0,1239)]. Na comparação entre os momentos, não foi observada diferença estatística para SG [SG, T0: 1,23 (0-511,6)=T12: 6,11 (0-230,5); p=0,075]. Entretanto, em casos de SSG, a interleucina-12 aumentou entre as avaliações T0 e T12 [SSG, T0: 0,24 (0-226,4)<T12: 1,32 (0-61,0); p=0,018]. As porcentagens médias de concordância entre o diagnóstico clínico e os achados laboratoriais foram de 59,7% e 58,5% respectivamente para SG e SSG, sem diferença estatística entre os grupos e momentos de avaliação (p&gt;0,05). Para ambos os grupos, não houve correlação entre interleucina-12 na admissão e o escore PRISM. CONCLUSÃO: A interleucina-12 não diferencia as condições sépticas e não se relaciona com a gravidade da doença por ocasião da admissão. Em pacientes com choque séptico, a interleucina-12 aumenta com o tempo.

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