Os casos de infeções fúngicas, com particularidade em infeções causadas por espécies do género Candida spp., nas últimas décadas, têm aumentado a sua incidência no mundo. A Candidose Vulvovaginal é uma infeção vaginal, causada por leveduras do género Candida, prevalente em mulheres em idade fértil, que afeta milhões de mulheres no mundo. Caracteriza-se pela ocorrência de sintomas na vagina e na vulva, como prurido, inchaço, irritação da vulva e uma secreção espessa e irregular. Classicamente, os sintomas na vulva estão associados à disseminação do fluido vaginal infetado. No entanto, estudos mais recentes descrevem a ocorrência de sintomas vulvares associados à recuperação da levedura deste nicho sem envolvimento vaginal. Assim, de modo a compreender melhor o papel da vulva nessa dinâmica, neste estudo, objetivamos identificar e caracterizar isolados de leveduras vulvares, através da suscetibilidade aos antifúngicos, da formação de biofilmes e produção de fosfolipases e hemolisinas, assim como avaliar a adesão, in-vitro, às células HeLa de isolados clínicos. Os resultados indicaram a presença de uma diversidade de espécies de leveduras Candida não - albicans; entre os 46 isolados vulvares, foram identificadas 11 espécies diferentes. A espécie mais frequentemente recuperada entre as amostras vulvares foi Candida parapsilosis (25%), seguida por Nakaseomyces glabratus (15%) e Meyerozyma guilliermondii (15%). No geral, verificou-se que 45% dos isolados vulvares eram resistentes ao fluconazol. A espécie Clavispora lusitanae foi a que produziu uma maior quantidade de biomassa de biofilme. Já a Pichia kudriavzevii foi a única espécie que produziu fosfolipase e detetou-se a produção de hemolisinas em isolados pertencentes a Nakaseomyces glabratus, Candida parapsilosis, Candida intermedia, Meyerozyma guilliermondii, Candidozyma haemulid e Clavispora lusitanae. Finalmente, verificou-se que Pichia kudriavzevii e Clavispora lusitanae aderiram às células HeLa. A grande diversidade de espécies encontrada, aliada à elevada taxa de resistência ao fluconazol e ao perfil virulento, leva a concluir que se considera necessária uma vigilância epidemiológica, para auxiliar o desenvolvimento de estratégias terapêuticas mais eficazes.

As espécies de Candida tanto comportam-se como fungos oportunistas como membros comuns da flora humana. Ao longo dos anos, o foco principal da micologia médica tem sido a compreensão do seu potencial patogénico e as diferentes formas de doença que estes microrganismos podem originar. O número de infeções tem aumentado nos últimos anos, grande parte resultante da evolução dos cuidados médicos e cirúrgicos. O risco depende de muitos fatores, entre eles a exposição a diferentes antibióticos e procedimentos médicos. O objetivo deste ensaio é determinar a incidência das colonizações e infeções fúngicas pelo género de Candida, as principais características da população estudada, incluindo dados demográficos e fatores de risco intrínsecos e extrínsecos que favorecem o aparecimento de Candida. Este estudo retrospetivo, observacional inclui um total de 706 doentes de um hospital português, dos quais foram isolados espécies de Candida entre 1 de janeiro de 2015 e 31 de dezembro de 2019. A análise estatística foi realizada no Statistical Package for the Social Sciences 25.0. No intervalo de estudo observou-se 748 episódios (62 de candidoses invasivas). A incidência foi de 12,7 / 1000 admissões hospitalares. Foram identificadas nove espécies, sendo Candida albicans (73,8%) a mais prevalente, seguida por Candida glabrata (13,2%) e Candida tropicalis (4,8%). A maioria das amostras biológicas isoladas foi de urina. Relatamos uma taxa de mortalidade a 30 dias de 34% e a generalidade dos episódios comprovou-se em doentes com mais de 70 anos. Os fatores de risco mais observados foram a antibioterapia prévia (93,3%), a presença de sonda vesical (67,4%), a intubação nasogástrica (42,5%) e diabetes mellitus (41,4%). O fluconazol foi o principal fármaco prescrito em todos os episódios. A distribuição das espécies de Candida tem vindo a alterar-se no nosso hospital com um aumento na proporção de espécies não-albicans. Assim, a distribuição das espécies, a suscetibilidade a antifúngicos, os fatores de risco e a mortalidade devem ser analisados continuamente. Este estudo fornece informações essenciais sobre a epidemiologia local do género Candida.

A frequência das infeções fúngicas tem vindo a aumentar nos últimos tempos devido à crescente resistência aos antifúngicos, e por isso, têm-se tornado mais relevantes, especialmente em indivíduos com condições de saúde subjacentes ou com sistema imunológico enfraquecido. Por outro lado, atualmente, estima-se que cerca de 150 milhões de pessoas são afetadas por infeções do trato urinário (ITU) todos os anos, sendo que uma em cada cinco mulheres adultas tem pelo menos um episódio durante a sua vida. Enquanto isto, a candidose vaginal está associada ao crescimento excessivo das espécies de Candida, que por sua vez, tem um impacto significativo na saúde sexual das mulheres. Embora, as infeções por Candida constituam um problema na saúde pública a nível mundial, a sua caracterização epidemiológica no trato geniturinário é difícil de determinar, devido à falta de estudos que correlacionam os dois nichos. O objetivo deste estudo foi estudar a relação entre a micobiota vaginal e urinária dos quadros clínicos de infeções vaginais e infeções urinárias causadas por Candida, através da suscetibilidade aos antifúngicos, da formação de biofilmes e tubo germinativo, assim como a adesão in-vitro às células HeLA de isolados clínicos. Os resultados evidenciaram maior suscetibilidade antifúngica e formação de tubo germinativos em isolados de uroculturas masculinas. Porém, as leveduras dos isolados de mulheres, demonstraram maior capacidade de infeção e adesão. Contudo, os isolados que mostraram maior patogenicidade são de utentes hospitalizados e de idade avançada. Deste modo, observa-se uma maior patogenicidade em isolados provenientes de utentes femininas com infeção urinária. Neste sentido, considera-se necessária a vigilância epidemiológica, auxiliando o diagnóstico com a correlação de estudos clínicos e a confirmação da presença da levedura.

Na área da reprodução, a importância das infecções genitais surge pela sua influência evitável no desenvolvimento de infertilidade. Infecções genitais têm potencial para alterar a cérvice e o muco cervical dificultando a passagem dos espermatozóides, e para causar doença inflamatória pélvica e consequente oclusão tubária, sendo esta um dos principais factores de infertilidade. A eficácia de técnicas de Procriação Medicamente Assistida é alterada na presença de infecções genitais. Adicionalmente, a sua propagação ascendente para o útero gravídico provoca infecção e inflamação da decídua e dos anexos embrionários sendo a causa de abortos espontâneos recorrentes. O maior foco de interesse científico incide sobre infecções de etiologia sexualmente transmissível (como Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Trichomonas vaginalis) e as espécies Mycoplasma hominis e Ureaplasma urealyticum. Bactérias associadas a Vaginose Bacteriana, Streptococcus agalactiae, e espécies Candida foram também identificadas em mulheres com infertilidade. Este estudo retrospectivo visa calcular a prevalência de agentes infecciosos genitais em mulheres com tempo de infertilidade igual ou superior a doze meses (n=190) seguidas na Unidade de Medicina da Reprodução do Centro Hospitalar Cova da Beira, no período de Agosto de 2009 a Agosto de 2011. Como rotina da Unidade, realizou-se a colheita de amostras vaginais e endocervicais para pesquisar Trichomonas vaginalis, espécies Ureaplasma e Mycoplasma hominis via teste “MycoView”®, Chlamydia trachomatis via teste “QuickVue”®, e outras espécies via cultura em meios específicos. Das mulheres estudadas, 42,63% apresentam infecção genital. O agente mais prevalente é o Ureaplasma urealyticum, numa percentagem (29,47%) superior à detectada noutros estudos. Candida spp. foi o segundo agente com maior prevalência(15,26%), e a pesquisa de Chlamydia trachomatis foi positiva em apenas uma mulher. Nenhuma das mulheres estudadas apresentava infecção por Neisseria gonorrhoeae nem Trichomonas vaginalis. É recomendável a aplicação dos métodos mais sensíveis e específicos disponíveis para rastreio de infecções genitais, promovendo uma prevenção eficaz de problemas de subfertilidade e de complicações após procedimentos invasivos e contribuindo para o sucesso da actuação da Unidade de Medicina da Reprodução.

Fungal diseases currently affect about a quarter of the population worldwide. Fungi infections caused by Candida albicans have been described as a significant concern to public health. The spectrum of clinical diseases caused by this fungi species range between vulvovaginal candidiasis, oral candidiasis, candidemia and mucositis. The emergence of resistance mechanisms towards antifungal therapy greatly hampers successful management of illness and patient outcome. Nystatin, an antifungal drug, is categorized as a class IV of Biopharmaceutical Classification System, presenting low aqueous solubility and low intestinal permeability. Nowadays, the emerging platform of nanotechnology and lipid nanoparticles, notably solid lipid nanoparticles (SLN), has been subject to growing attention over recent past, owing to the promising properties of vectorization among a substantial variety of pharmaceutical drugs. Due to its hydrophobic proprieties, nystatin was encapsulated in SLN. Thus aiming to understand the relationship between the use of nanosystems and the improvement of the therapeutic effect. The aim of this work was to formulate SLN with nystatin by different methods (high speed homogenization and ultrasonication) with optimization of several parameters and formulation of 2 gels (one of them containing nanoparticles). Initially, 3 lipids were used: Compritol®  888 ATO, cetyl palmitate and Precirol®  ATO 5 and, after the study of several parameters (size, encapsulation efficiency (EE) and polymorphic behaviour of the lipids), Precirol®  ATO 5 was chosen as the lipid with the most satisfactory results. The results of the present work showed that the assay method of nystatin was linear, specific and presented repeatability. The average diameter of empty nanoparticles (NPs) and with drug (Precirol-NYS NPs) was, respectively, 306 nm and 260 nm and an EE of 67.8%. Regarding stability, SLN with drug proved to be more stable than SLN without drug. The polymer used for formulation of gels was the polymer commonly known by the trade name Carbopol® 940. The yield of 0.5% Carbopol® gel preparations and 0.5% Carbopol® gel + 10% Precirol-NYS NPs were 87.2% and 91.39%, respectively.

Vulvovaginal Candidiasis is the second most common infection in women of childbearing age, in about 70 to 90% of cases; the associated etiologic agent is C. albicans. The increase in the incidence of non-albicans species has led to the emergence of cases of resistance to antifungals, which is why the importance of new approaches in treatment. The objective of the present work was to develop and test in vivo a nanostructured system containing fluconazole and Green Propolis for the treatment of Vulvovaginal Candidiasis. The nanoparticles containing Fluconazole and Green Propolis were prepared following the technique of ionic gelation and presented satisfactory physical characteristics for the intended purpose. The association efficiency for the complexed compounds was performed using the technique of High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and UV spectrophotometry. The Minimum Inhibitory Concentrations (MIC) for Fluconazole, Green Propolis and nanoparticles were determined, showing efficacy for use and fungistatic action on C. albicans ATCC 10231. Release analyzes of up to 72 hours with stabilization up to 96 hours were verified in the nanoparticles. The toxicity tests by hemolysis and Galleria mellonella, demonstrated positive results for propolis and negative for nanoparticles, suggesting safety in their use in a method with a murine model. In vivo tests were performed with an indication of efficacy for the proposed formulation.

Infections caused by yeasts of the genus Candida are called candidiasis and are considered opportunistic diseases with characteristics ranging from superficial to disseminate. Candida species may develop defense mechanisms to the major antifungal agents available for clinical use against infections, making it difficult and limiting treatment. Natural products can be a source of bioactive compounds against infectious diseases, such as the Curcuma longa Linn or saffron plant as it is popularly known that it has the compound curcumin. This vegetable is used in large scale by the population as food condiment and as natural medicine against inflammatory diseases and infectious diseases. Laboratory-synthesized compounds have been to interest in medical biotechnology, among which the hydrazone derivatives are associated with antimicrobial including antifungal, antioxidant, antiparasitic, anticonvulsive, analgesic, anti-inflammatory and antitumor activity. The objectives were to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC) of curcumin and n-acylhydrazone compounds, and also to verify the time-kill curve of Candida, to quantify ergosterol and to evaluate hemolysis of red blood cells after action of both compounds. Twenty isolates Candida spp. in the broth microdilution test for evaluation of the MIC and MFC of the compounds. The time-kill curve and ergosterol assay were checked after treatment of C. albicans ATCC 28367 with the compounds. To evaluate the cytotoxicity of these compounds sheep red blood cells were used. The compound curcumin showed MIC values between 16 and 256 μg/mL and MFC between 128 and values greater than 512 μg/mL. For the n-acylhydrazone derivative the MIC values ranged from 2 to 128 μg/mL and the MFC variation ranged from 256 to values greater than 512 μg/mL. The compounds showed fungistatic action on the growth kinetics of Candida over 48 hours. The determination of ergosterol after contact with the agents in MIC of 64 μg/mL of curcumin and 16 μg/mL of nacylhydrazone was reduced by 29.56 and 53.57%, respectively. The compounds showed hemolytic activity at concentrations of 512 μg/mL. The results observed in this work show that the curcumin and the n- acylhydrazone derivative have promising antifungal properties.

Ultimamente muitos países, assim como o Brasil, assistem a um aumento significativo das infecções fúgicas nosocomiais invasivas. Devido a avanços tecnológicos na medicina nas duas últimas décadas como o uso do cateter, sondas, novas técnicas cirúrgicas e outros, aumentaram de forma expressiva a qualidade de vida de pacientes críticos. Em contrapartida, infecções fúngicas invasivas surgiram como complicação nestes pacientes. Dentre os diversos agentes etiológicos encontrados no ambiente hospitalar o gênero Candida é o patógeno mais isolado e está associado a altas taxas de morbidade e mortalidade. O presente trabalho recuperou 100 cepas já isoladas de diferentes estabelecimentos de saúde do Rio de Janeiro no período de 2013 a 2014, essas amostras foram submetidas a provas cromógenas, tubo germinativo, produção do clamidósporos, espectrometria de massas e Provas de Sensibilidade a antifúngicos. Essas cepas foram encontradas em vários sítios anatômicos, onde 44% desses isolados foram obtidos por urinocultura, e o setor com maior incidência foi Centro de Tratamento Intensivo (CTI) com 40% das amostras isoladas. A região de Niterói foi o município com maior percentual de isolados fúngicos (52%). Foramidentificadas as seguintes espécies: Candida tropicalis, C. albicans, C. parapsilosis sensu stricto, C. guilliermondii, C. glabrata,C. krusei, C. metapsilosis e C. dubliniensis. Espéciesnão-albicans apresentaram se mais resistente aos antifúngicos usados neste trabalho e a anfotericina B mostrou ser o antifúngico mais eficaz nesta pesquisa principalmente em relação às cepas de C. albicans.A Candida tropicalisfoi a espécie mais isolada neste trabalho superando a Candida albicans na maioria dos setores e nos sítios anatômicos. Sendo assim, a identificação dessas cepas fúngicas é fundamental para localizar a fonte da infecção e acompanhar o tratamento clínico tornando-o mais assertivo e assim evitando uma estada mais longa dos pacientes no ambiente hospitalar e diminuindo gastos mais expressivos com esse tipo de infecção

Dentre as várias espécies fúngicas descritas na literatura, as leveduras do gênero Candida são os agentes de infecção hospitalar de maior importância em Unidade de Terapia Intensiva (UTI), representando um desafio à sobrevida dos pacientes com graves doenças de base, devido à suscetibilidade destes pacientes à invasão fúngica. A identificação fenotípica das leveduras assim como levantamentos periódicos podem revelar tendências importantes ou mesmo o surgimento de novas espécies, auxiliando o desenvolvimento de medidas preventivas direcionadas. Os objetivos deste trabalho foram realizar um levantamento epidemiológico das leveduras encontradas em ponta de cateter e hemoculturas de pacientes de uma UTI oncológica e comparar espécies isoladas, verificando diferenças de frequência em relação ao local isolado. Trata-se de um estudo observacional retrospectivo analítico-descritivo realizado na UTI de um instituto oncológico, no período de janeiro de 2010 a dezembro de 2013, a partir do banco de dados do Laboratório de Microbiologia e da Comissão de Controle de Infecção Hospitalar (CCIH), coletados em formato eletrônico e processados para análise estatística para avaliar correlação de espécies pelo programa SPSS 20.0 e medida de tendências. Os resultados foram, para ponta de cateter, 40 foram positivas, sendo 15 para C. albicans (37,5%), 13 para C. parapsilosis (32,5%), 05 para C. tropicalis (12,5%) e 07 para outras leveduras (17,5%). Quanto às hemoculturas 58 foram positivas, sendo 18 para C. albicans (31,0%), 17 para C. tropicalis (29,3%), 10 para C. parapsilosis (17,2%), 05 para C. krusei (8,6%) e 08 para outras leveduras (13,9%). Foram encontradas diferenças quanto à frequência das espécies em relação a topografia estudada.