O presente relatório de estágio insere-se na unidade curricular “Estágio” do Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas da Universidade da Beira Interior. Encontra-se estruturado em três capítulos, que descrevem a experiência profissionalizante nas áreas de investigação, farmácia hospitalar e farmácia comunitária, respetivamente. O primeiro capítulo, correspondente à vertente de investigação, descreve o trabalho de investigação efetuado no Centro de Investigação em Ciências da Saúde da Universidade da Beira Interior, intitulado “Caracterização fenotípica de estirpes de Candida spp. isolados em amostras do trato urinário.” O género Candida spp. é dos mais importantes patógenos oportunistas, sendo a principal causa de infeção fúngica em imunodeprimidos. Normalmente, coloniza a pele, unhas, o trato gastrointestinal e urogenital. Esta colonização pode levar a uma infeção na presença de um decréscimo das defesas do hospedeiro. O estudo realizado teve como objetivo a caracterização dos isolados clínicos do trato urinário, através da avaliação da prevalência das espécies, determinação da suscetibilidade ao clotrimazol e da capacidade de formação de biofilmes. Para isso, foram isoladas as estirpes dos serviços de internamento, urgência e consulta externa, dos utentes que realizaram uroculturas no CHUCB, entre dezembro de 2021 e julho de 2022. Para a identificação das espécies utilizaram-se meios seletivos (C. albicans) e análise automatizada dos perfis bioquímicos (não-C. albicans). A concentração inibitória mínima para o clotrimazol foi determinada recorrendo ao método de microdiluição em caldo. A formação de biofilmes foi aferida através do método colorimétrico de biomassa total de biofilmes simples. Foi obtida, num total de 36 amostras, a seguinte distribuição: 27 C. albicans, 4 C. glabrata, 2 C. parapsilosis, 1 C. guilliermondii, 1 C. ciferri, 1 C. magnoliae. A maioria dos isolados foram recolhidos de utentes do sexo feminino (52,78%) e de origem do serviço de internamento (63,89%). Concluiu-se que todas as estirpes foram suscetíveis ao clotrimazol (CMI50<1 mg/L). Todas as estirpes testadas foram capazes de produzir biofilme, tendo a estirpe C. albicans testada demonstrado uma menor biomassa total comparativamente às restantes espécies. Assim, conclui-se que as estirpes isoladas do trato urinário demonstram ter suscetibilidade antifúngica, mas uma grande capacidade de formação de biofilme. Com este estudo aferiu-se que a possibilidade de profilaxia com clotrimazol em populações de risco poderá ser uma estratégia para o controlo da infeção. O segundo capítulo remete para as competências e conhecimentos adquiridos no estágio curricular em Farmácia Hospitalar, realizado no Centro Hospitalar Universitário Cova da Beira (CHUCB), na Covilhã, que teve início a 6 de outubro e término a 25 novembro de 2022, sob a orientação da diretora dos Serviços Farmacêuticos, Drª. Olímpia Fonseca. O terceiro e último capítulo descreve as competências e conhecimentos adquiridos durante o estágio curricular em Farmácia Comunitária, realizado na farmácia Sant’Ana, na Covilhã, entre 28 de novembro de 2022 a 17 de fevereiro de 2023, sob orientação da diretora técnica, Drª. Paula Bártolo.

Os sistemas de tratamento biológicos convencionais não removem a totalidade dos constituintes presentes nas águas residuais domésticas, sendo frequente a presença nos seus efluentes de residuais (e.g. matéria orgânica solúvel, biodegradável ou refractária, produtos resultantes da actividade microbiológica e compostos inorgânicos solúveis) que podem causar impactes ambientais significativos nas massas hídricas e no solo, nomeadamente nos seus potenciais usos. Quando o meio receptor é sensível à descarga destes constituintes remanescentes ou, a jusante é utilizado para determinados usos, é necessário efectuar a sua remoção, podendo ser utilizados sistemas de tratamento avançados ou de afinação como é o caso dos filtros biológicos de leito imerso. Apesar de existirem vários estudos sobre a aplicabilidade destes sistemas na eliminação de nutrientes, a sua utilização para a remoção de residuais de carbono não tem sido, contudo, avaliada. Nestes termos, o objectivo principal deste trabalho centrou-se no estudo da biodegradação de residuais de carbono, comuns em efluentes de tratamento secundário de águas residuais urbanas e água bruta de origem superficial, através da utilização de um filtro biológico de leito imerso, tendo, complementarmente, sido estudada a remoção de azoto (amónio e formas oxidadas de azoto). Realizaram-se ensaios complementares para o estudo das condições hidrodinâmicas no filtro e ensaios para avaliar as condições básicas de operação, tendo em atenção a estabilidade do processo e a evolução da perda de carga no leito ao longo do tempo. Nos ensaios de biodegradação foram utilizados substratos simples (acetato) e complexos (água residual doméstica e água de origem superficial), tendo-se testado diferentes condições de carga (carga orgânica aplicada e razão C/NH4+-N) e de operação (arejamento, ciclo de lavagem e número de passagens pelo leito). Os resultados permitiram concluir, para a gama de cargas orgânicas (5,2 g C m-3 h-1 a 77,3 g C m-3 h-1) e de azoto amoniacal (0,2 g NH4+-N m-3 h-1 e 38,7 g NH4+-N m-3 h-1) aplicadas, que o filtro utilizado permitia obter remoção carbonada, nitrificação e desnitrificação, a taxas de eliminação satisfatórias. Não se observou, contudo, remoção de qualquer dos compostos para cargas inferiores a 5,2 g C m-3 h-1 e 1,5 g NH4+-N m-3 h-1. A remoção mais importante, quer de carbono, quer de azoto amoniacal, foi observada no intervalo de cargas orgânicas médias entre 25,7 g C m-3 h-1 e 77,3 g C m-3 h-1, em particular na parte superior do leito (8,0 cm iniciais) onde ocorreu forte dispersão, o oxigénio dissolvido apresentou as concentrações mais elevadas, foram observadas maiores produções de biomassa e uma camada de biofilme mais densa. A adopção de uma segunda passagem pelo leito contribuiu para o aumento da remoção de ambos os compostos, apenas para cargas orgânicas médias superiores a 25,7 g C m-3 h-1. Os resultados permitiram, ainda, constatar que a remoção de formas oxidadas de azoto, essencialmente constituídas por nitratos, independentemente do tipo de substrato e das condições de carga e de operação utilizadas, ocorreu, principalmente, por desnitrificação. Nestes termos, a utilização de filtros biológicos de leito imerso para a remoção de residuais de carbono, poderá constituir alternativa económica e tecnicamente vantajosa tendo em vista, quer a redução de impactes ambientais de descargas em meios hídricos e no solo, quer a produção de efluentes com potencial de reutilização, podendo, complementarmente, ser obtida a remoção de azoto.

O papel da comunidade fúngica, a micobiota, na saúde da mucosa vaginal é uma área de investigação muito atual. O aparecimento de novas tecnologias de sequenciação e avanços na bioinformática permitiram descobrir novas espécies de fungos neste nicho. Candida spp. constitui o grupo mais importante de fungos patogénicos oportunistas, sendo o mais prevalente em infeções vulvovaginais. Contudo fungos como a Rhodotorula spp., Cryptococcus spp. e Malassezia spp. têm vindo a emergir como potenciais patogénicos deste nicho, sendo por isso relevante, do ponto de vista cientifico, perceber qual a sua interação ecológica com a C. albicans quando estão presentes em co- cultura. O objetivo deste estudo foi avaliar qual o impacto das novas leveduras na patogenicidade da C. albicans, no crescimento in-vitro, na formação de biofilme invitro em diferentes momentos de colonização (mistos e pré- formados) e na formação de tubo germinativo. Os ensaios foram realizados com uma única espécie ou com coculturas de C. albicans ATCC10231 com uma outra espécie de levedura, R. mucilaginosa DSM13621, M. furfur DSM6170 e C. albidus DSM70215. Os resultados mostraram que a M. furfur cria uma relação de simbiose com a C. albicans demonstrando uma maior taxa de crescimento em co-cultura (aproximadamente 1/3), um aumento da biomassa do biofilme, quando misturadas (154,1%) e pré- formados (166,8%) e um aumento da formação de tubo germinativo da C. albicans (119,8%). Já para as leveduras R. mucilaginosa e C. albidus a relação é antagónica (com um decréscimo significativo em todos os ensaios), inibindo a patogenicidade da C. albicans.

género Arcobacter tem atualmente 18 espécies descritas, das quais se destaca a espécie A. butzleri, uma vez que esta é atualmente considerada um agente enteropatogénico zoonótico emergente tanto para animais como para humanos. Este microrganismo é geralmente detetado em produtos de origem alimentar e em água, possuindo também elevada resistência antimicrobiana a antibióticos e desinfetantes o que tem conduzido, nos últimos anos, à necessidade de desenvolver novas técnicas e investigar novos compostos para o controlo e, em última instância, erradicação desta bactéria. O resveratrol, principal composto da família das fitoalexinas, possui inúmeras propriedades bioativas, nomeadamente a atividade antimicrobiana contra fungos e bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, tendo sido recentemente demonstrada a sua inibição sobre espécies de Arcobacter. De modo a fomentar a utilização deste composto em diversas aplicações, a sua baixa estabilidade e solubilidade aquosa têm vindo a ser ultrapassadas pela sua complexação e inclusão em diversos polímeros como, por exemplo, ciclodextrinas, sais biliares e microesferas poliméricas. De facto, a complexação do resveratrol com ciclodextrinas modificadas demonstrou um aumento considerável da solubilidade aquosa e da fotoestabilidade deste composto. Desta forma, o objetivo deste trabalho residiu no estudo da atividade antimicrobiana do resveratrol (RV), sob a forma de complexos de inclusão com a ciclodextrina modificada hidroxipropil-gama-ciclodextrina (HP-?-CD) contra uma estirpe de referência de A. butzleri (LMG 10828), dois isolados de origem animal (AB 17/11 e AB 36/11) e dois isolados de origem clínica (INSA 593 e INSA 776). Primeiramente procedeu-se à determinação dos fatores de virulência, onde os dois isolados clínicos revelaram a presença dos genes cadF, tlyA, cj1349, hecA, pldA, ciaB e mviN; a estirpe AB 36/11, apresentou mais um gene, o hecB, enquanto as estirpes LMG 10828 e AB 17/11 além dos oito genes descritos anteriormente, apresentaram no seu genoma o gene irgA. A resistência das estirpes a 9 antibióticos comuns foi também determinada, observando-se para a estirpe de referência e para os isolados clínicos a resistência à ampicilina, à amoxicilina, à vancomicina, à cefoperazona, à piperacilina e ao trimetoprim. Para além de apresentar resistência a estes antibióticos, a estirpe AB 36/11 tem resistência à ciprofloxacina. A estirpe AB 17/11 foi de todas elas, aquela que apresentou maior suscetibilidade, uma vez que o seu perfil de resistência inclui apenas os antibióticos vancomicina, ciprofloxacina e trimetoprim. A suscetibilidade do microrganismo aos complexos de inclusão (CI) formados foi determinada pelo método de microdiluição, onde se observou uma concentração mínima inibitória (CMI) de 256 µg/mL para as estirpes LMG 10828 e INSA 776 e 64 µg/mL para AB 36/11, AB 17/11 e INSA 593. Nesta fase foi também avaliada a suscetibilidade na presença de RV livre, obtendo-se uma CMI de 100 µg/mL para as cinco estirpes. De modo a determinar a ação bacteriostática ou bactericida dos CIs foram realizadas curvas de morte para um isolado clínico (INSA 776) e um de origem animal (AB 36/11), o que permitiu concluir que os CIs possuem atividade bactericida dependente tanto do tempo de incubação como da concentração de agente antimicrobiano. Para concentrações de CI correspondentes a 2x e 4x a CMI a viabilidade celular é semelhante para os dois isolados, sendo que o isolado de origem humana demonstrou ser mais suscetível. Para o RV livre, o efeito bactericida ocorre de forma mais rápida para 1x, 2x e 4xCMI em ambos os isolados. O mecanismo de ação dos CI foi avaliado por citometria de fluxo para estes dois isolados, usando os fluorocromos SYTO® 40 para marcação de todas as células, bis-(ácido 1,3-dibutilbarbitúrico) trimetina oxonol (BOX) e 5-ciano-2,3-ditolil cloreto de tetrazólio (CTC), para avaliação de alterações a nível do potencial de membrana e atividade metabólica, respetivamente. Os resultados de citometria de fluxo demonstraram que, com o aumento da concentração de CI, ocorre a diminuição da atividade metabólica das células e, consequentemente, o aumento da despolarização da membrana das mesmas. Dado que a formação de biofilmes por parte dos microrganismos está associada com a sua virulência, colonização e resistência a antibióticos, torna-se importante a sua monitorização bem como o estudo de formas que inibam o seu desenvolvimento. Assim sendo, foi também evidenciada a ação dos CIs e do RV livre na formação e na promoção da dispersão de biofilmes pré-formados, com elevada redução de biomassa de biofilme para as concentrações de 1x, 2x e 4x a CMI. De forma geral, os resultados demonstram que os CIs apresentam atividade antimicrobiana sobre os isolados de A. butzleri tanto em células planctónicas como em biofilmes, sugerindo a aplicação destas formulações como soluções de origem natural para a indústria alimentar contra o desenvolvimento de Arcobacter spp.

O aumento da severidade das patologias tem levado ao uso excessivo e por vezes inadequado de antibióticos. Esta situação tem contribuído para o aparecimento de estirpes bacterianas multirresistentes que são motivo de preocupação a nível hospitalar. O Acinetobacter baumannii é um microrganismo associado a infecções nosocomiais e responsável por uma grande percentagem de infecções adquiridas nas unidades de cuidados intensivos em todo o mundo. Esta bactéria é ubiquitária e frequentemente saprófita, tendo a capacidade de sobreviver por períodos muito longos em ambientes hospitalares, devido à capacidade de aderir a superfícies e formar biofilmes. O crescente aumento de estirpes de A. baumannii resistentes a antibióticos e a sua elevada capacidade de formação de biofilmes torna urgente a modificação dos actuais métodos de tratamento e a investigação de alternativas terapêuticas. Os agentes naturais, nomeadamente os óleos essenciais, podem ser uma alternativa promissora, relativamente aos antibióticos convencionais, uma vez que há vários relatos das suas propriedades antimicrobianas. O óleo essencial de sementes de Coriandrum sativum, para além da sua frequente utilização na indústria alimentar, também é conhecido como um potente agente antibacteriano. Neste trabalho avaliou-se o potencial antimicrobiano do óleo essencial de sementes de Coriandrum sativum sobre A. baumannii quer em células planctónicas quer em biofilmes, assim como o eventual efeito sinergético entre antibióticos e o óleo essencial e o seu efeito em eritrócitos humanos. Foi ainda estudada a motilidade e capacidade de formação de biofilmes de isolados clínicos de A. baumannii com resistência a múltiplos antibióticos convencionais. Os resultados sugerem que o óleo essencial de sementes de coentros tem um rápido efeito bactericida em A. baumannii, tanto em células em fase exponencial como em fase estacionária de crescimento, e que este óleo em combinação com cloranfenicol, ciprofloxacina, gentamicina ou tetraciclina tem um efeito sinergético. Também foi evidenciado que este óleo inibe a formação de biofilmes e promove a dispersão de biofilmes previamente formados. Por fim, ainda se observou que todas as estirpes clínicas apresentaram capacidade de formar biofilmes, não se verificando relação entre a capacidade de formação de biofilme e a amostra onde foi isolada a estirpe, o sexo do paciente, a resistência a antibióticos ou a motilidade. Assim, o óleo essencial de sementes de coentros mostrou grandes potencialidades no controlo de infecções e na dispersão de biofilmes formados por A. baumannii, mostrando ser um potencial agente terapêutico contra infecções por este microrganismo, com a particularidade de não apresentar citotoxicidade em eritrócitos humanos.

A microbiota vaginal é alvo de diversos estudos devido a sua diversidade de microrganismos. Um dos microrganismos que se podem estabelecer na microbiota vaginal é o vírus do papiloma humano (HPV – Human Papillomavirus) que se estabelece nas células imaturas do trato genital feminino. Após a infeção pelo HPV e subsequente evasão do sistema imune, o vírus entra na sua fase de disseminação celular e pode persistir por meses ou até mesmo por anos podendo ocasionar lesões intraepiteliais de baixo ou alto grau. Com este estudo, pretendem-se avaliar os diferentes tipos de microbiota cervical e identificar as suas características no esfregaço de material residual de citologia em meio líquido, associando com o HPV e com Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum, Trichomonas vaginalis. Para a realização dos ensaios, utilizou-se Xpert HPV que utiliza PCR em tempo real (RTPCR) de segunda geração para deteção de infeção por HPV de alto risco de células escamosas. Para a identificação dos agentes do painel de IST (Infeção Sexualmente Transmissível), realizou-se o ensaio de PCR (Polymerase Chain Reaction) em tempo real utilizando-se o multiplex Allplex™ STI Essentials Assay. Para a confeção das lâminas, realizou-se a técnica de Gram. Os resultados mostram que a heterogeneidade da microbiota, a quantidade e a capacidade de formação de biofilmes são significativamente maiores em quadros de vaginose bacteriana. Verificou-se que a Candida sp só foi evidenciada na vaginose bacteriana do tipo 1, sem a presença de bacilos curvos, sugestivo de Mobiluncus sp. Verificou-se que o agente Mycoplasma hominis e o HPV de alto risco possuem a maior percentagem quando sobreposto a presença de biofilme. O agente Mycoplasma hominis obteve resultado de 50% quando sobreposto aos parâmetros de vaginose bacteriana do tipo 2. Esses resultados mostram que o HPV de alto risco pode interferir na formação da microbiota vaginal assim a vaginose bacteriana possui relação com os agentes do painel de IST em especial o Mycoplasma hominis que representou 65% dos resultados.

O presente relatório foi escrito no âmbito da Unidade Curricular “Estágio”, com lugar no último ano letivo do Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas (MICF) da Universidade da Beira Interior (UBI). O relatório é composto por três capítulos distintos, sendo eles referentes à investigação conduzida no Centro de Investigação em Ciências da Saúde da Universidade da Beira Interior (CICS-UBI), à experiência profissionalizante na vertente de Farmácia Comunitária e à experiência profissionalizante na vertente de Farmácia Hospitalar. O primeiro capítulo é referente à investigação laboratorial conduzida no CICS-UBI, denominada de “Avaliação da atividade antifúngica de óleos essenciais de erva-príncipe combinada com clotrimazol no combate à candidíase vaginal”. Foram realizados vários ensaios para determinar o índice de Concentração Inibitória Fracionada (FIC) dos óleos essenciais de Cymbopogon citratus, Cymbopogon winterianus e Cymbopogon flexuosus em associação com o clotrimazol, segundo o método de diluições seriadas, na inibição do crescimento de Candida albicans. Com a combinação do clotrimazol com o óleo essencial (OE) de Cymbopogon flexuosus obtiveram-se resultados próximos da sinergia. Posteriormente, avaliou-se o impacto na formação de biofilmes da mesma espécie, comparando o comportamento dos ativos em combinação e isoladamente, onde as concentrações 0,0624 µg/mL de clotrimazol e a 0,0313% (V/V) de OE, a combinação (mix) revelou-se maioritariamente mais eficaz no combate à formação de biofilmes, representando uma estratégia eficaz para superar as resistências aos antifúngicos. No entanto, às concentrações dez vezes superiores dos ativos os resultados foram menos promissores. O segundo capítulo descreve a experiência profissionalizante em Farmácia Hospitalar, concretamente no Hospital São Teotónio do Centro Hospitalar Tondela-Viseu (CHTV). O estágio ocorreu de 4 de março de 2024 a 26 de abril de 2024. Neste relatório estão descritas as atividades abordadas durante 2 meses de estágio, onde tive oportunidade de passar por todos os setores dos Serviços Farmacêuticos do CHTV, desde a receção e armazenamento à dispensa de medicação. O percurso pelo hospital foi fundamental para o meu desenvolvimento enquanto Farmacêutica, onde complementei todos os conhecimentos adquiridos ao longo do curso na vertente hospitalar O terceiro capítulo descreve a experiência profissionalizante em Farmácia Comunitária, concretamente na Farmácia Grão Vasco, em Viseu. O estágio ocorreu de 29 de abril de 2024 a 19 de julho de 2024. No presente relatório está descrito o meu percurso pela vertente de Farmácia Comunitária, com relato de algumas situações reais de dispensa ao público. Tive oportunidade de acompanhar todos os setores da Farmácia Comunitária e rematar este percurso académico com uma visão holística do que é ser Farmacêutica.

Este relatório de estágio encontra-se dividido em dois capítulos: um relativo à componente de investigação laboratorial e outro relativo ao estágio curricular em farmácia comunitária. As infeções provocadas por Candida, designadas por candidoses, são muito prevalentes, afetando cerca de 75% das mulheres durante a idade fértil. Uma das estirpes mais associada a este tipo de infeção é Candida albicans, possuindo muitos fatores de virulência entre os quais a possibilidade de formar biofilmes. Os biofilmes são estruturas multicelulares envolvidas em substâncias poliméricas extracelulares, produzidas pelas próprias células, formando uma matriz. Os biofilmes, por constituírem uma barreira à penetração dos compostos antifúngicos, protegem as leveduras que se encontram inseridas nesta matriz, contribuindo para a virulência de Candida. Desta forma, torna-se essencial descobrir novas terapêuticas eficazes contra este fator de virulência. Este trabalho surge assim como uma possibilidade para o desenvolvimento de uma terapia sinérgica entre o clotrimazol e a tripsina, de forma a possibilitar a destruição de biofilmes. Neste projeto utilizou-se um modelo ex vivo suíno para testar diferentes concentrações de tripsina, clotrimazol e da associação de ambos, em biofilmes preformados de Candida albicans. Procedeu-se também à determinação da atividade enzimática da tripsina sobre a caseína, assim como se testou a viabilidade das células expostas a tripsina e clotrimazol, recorrendo à redução do MTT. O estágio curricular em farmácia comunitária, realizado na farmácia de Bodiosa, em Viseu, decorreu entre 26 de janeiro e 13 de junho, e permitiu-me integrar uma equipa de trabalho focada no utente e no seu acompanhamento. O capítulo II descreve o funcionamento de uma farmácia comunitária e todas as atividades que realizei na mesma: geração e receção de encomendas, armazenamento, atendimento ao público, medição de parâmetros fisiológicos, entre outros.

Este trabalho teve como objetivo a avaliação da qualidade microbiológica de uma linha de doces e se esta compromete a segurança do produto final, através do desenvolvimento de um plano de controlo microbiológico do ambiente e superfícies. Para a monitorização da qualidade do ar e das superfícies, foram realizadas análises microbiológicas para a avaliação dos seguintes grupos microbianos: microrganismos totais, coliformes totais, bolores e leveduras. A amostragem da qualidade do ar foi feita pelo método de sedimentação simples. Os resultados obtidos revelaram que dois dos pontos avaliados apresentaram contaminação por Escherichia coli. No entanto, esta contaminação pareceu tratar-se de um caso pontual. A análise microbiológica realizada a superfícies, indica que a maioria dos pontos analisados não apresentavam contaminações microbiológicas significativas. A avaliação microbiológica do produto final evidenciou, num nível satisfatório, a presença dos grupos microbianos utilizados como indicadores, o que sugere que o nível de contaminação do ar e das superfícies avaliadas ao longo deste estudo, parece não causar impacto na qualidade microbiológica do produto final.

Os íons metálicos, ferro e cobre são essenciais para todas as células, pois eles cumprem funções celulares indispensáveis para manutenção da vida, atuando como cofatores enzimáticos, elementos da estrutura da membrana celular do DNA e de enzimas. Não obstante, em concentrações elevadas, os íons ferro e cobre podem levar a formação de espécies reativas de oxigênio (EROs), atuando principalmente na peroxidação de lipídeos de membrana e no bloqueio da ação de enzimas fundamentais para o metabolismo celular. A produção de ERO é um dos mecanismos pelos quais os metais podem interferir na sobrevivência e virulência de espécies bacterianas. Estudos têm mostrado que os íons metálicos podem interferir na formação de biofilmes além de causar mudanças no perfil de resistência bacteriana a diferentes classes de antimicrobianos. A utilização de metais como agentes antimicrobianos é uma prática utilizada desde a antiguidade. Entretanto poucos estudos abordam a influência desses íons metálicos na formação de biofilme e no perfil de resistência. No presente estudo utilizamos os íons ferro e cobre nas concentrações de 100μM e 200μM (para os dois íons) para avaliar a resposta da produção de biofilme em Escherichia coli enteroagregativa (EAEC), Escherichia coli uropatogênica (UPEC) e Escherichia coli K-12 (selvagem e mutantes deficientes em enzimas de reparo do DNA) frente a esses íons metálicos. Para isso utilizamos os testes de formação de biofilme qualitativo e quantitativo, o teste de viabilidade em biofilme e o teste de toxicidade. No teste de formação de biofilme quantitativo, para EAEC 042 houve redução significativa do biofilme na presença de ferro e de cobre nas concentrações de 100 μM e 200 μM, respectivamente. Para EAEC I49/3 houve aumento da produção de biofilme na presença de ferro na concentração de 200μM e nas concentrações de 100μM e 200μM de cobre. Já no grupo das UPEC houve aumento expressivo de biofilme para a cepa 7104 na concentração de 100 μM e 200μM de cobre. A cepa 666 teve um aumento de biofilme nas concentrações de200μM de íon ferro e 100 μM e 200μM de cobre. Dentre as cepas de E. coli K-12, foi observado aumento de biofilme para a cepa selvagem AB1157 nas concentrações de 100μM e 200μM de cobre. No teste qualitativo, a cepa selvagem de E. coli K-12 (AB1157) apresentou filamento quando tratada com 100 μM de cobre e o mutante BW9091 na concentração de 100 μM de ferro. No teste de viabilidade 100% da cepa BW 528 (duplo mutante nfo- e nth-) morreram quando tratada com cobre. No teste de resistência a antibióticosa cepa de UPEC 7104 apresentou mudança no perfil de sensível para resistente quando tratada com o antibiótico ciprofloxacino junto aos íons ferro e cobre.A cepa 9260apresentou mudança no perfil de resistência para sensível quando tratada com cefuroxime,cefoxitina,cefotaxime,ceftazidime e ciprofloxacino, porém quando tratada com trimetoprima e trimetoprima/sulfametoxazol apresentou mudança no perfil de sensível para resistente junto aos dois íons metálicos. Os resultados obtidos até o presente momento evidenciaram que os íons metálicos interferem com a produção de biofilme em bactérias patogênicas, modulando a virulência desses microrganismos. Os íons cobre e ferro apresentam-se como uma possível estratégia de controle microbiano, uma vez que modulam o perfil de resistência aos antimicrobianos nesses microrganismos estudados.